高效液相色譜儀（HPLC）的性能確認是保證儀器能夠滿足分析要求的重要步驟。所謂性能確認，指的是對HPLC系統(tǒng)的各項關(guān)鍵性能進行檢測和評估，確保儀器狀態(tài)和功能符合法規(guī)或方法標準的相關(guān)要求。這一環(huán)節(jié)是分析實驗室質(zhì)量管理體系（如GLP/GMP、ISO/IEC 17025等）的必要內(nèi)容，也稱為“系統(tǒng)適用性確認”或“儀器合格性確認”（PQ/Performance Qualification）。

下面系統(tǒng)介紹高效液相色譜儀的性能確認內(nèi)容和流程。

一、確認范圍

主要包括：輸液系統(tǒng)（泵）、進樣器、柱溫箱、檢測器、數(shù)據(jù)處理等模塊的關(guān)鍵參數(shù)。

二、性能確認的常見項目與方法

1. 流量準確性（泵）

內(nèi)容：設(shè)定流速后，以量筒收集出液體積并測時，計算實際流速。

標準：實測流速與設(shè)定流速的相對偏差一般應(yīng)≤2%。

方法：如設(shè)1.00 mL/min，連續(xù)收集10 min，應(yīng)收1.00×10=10 mL，稱重或量取。

2. 流量穩(wěn)定性（泵脈沖性）

內(nèi)容：同一條件下多次收集同一時間內(nèi)的流出液體積，或觀察總離差。

標準：通常RSD≤1%（具體按廠家或法規(guī)）。

3. 進樣重復(fù)性（自動/手動進樣）

內(nèi)容：用同一標準溶液分析多次進樣，考察峰面積或峰高的RSD。

標準：一般RSD≤1%（≤2%視檢測條件及法規(guī)）。

4. 檢測器噪音與漂移

內(nèi)容：

噪音：基線的短時波動大小（列如5min內(nèi)峰—谷差）。

漂移：基線的長期慢漂移幅度。

標準：按廠家說明書或方法標準（如UV檢測噪音<20μAU，漂移<100μAU/h）。

方法：裝純?nèi)軇O(shè)定參數(shù)，空運行，測量基線波動。

5. 檢測器線性范圍與相關(guān)性

內(nèi)容：用不同濃度的標準溶液進樣，繪制校準曲線，計算相關(guān)系數(shù)R2。

標準：R2≥0.99，滿量程無明顯響應(yīng)飽和。

6. 保留時間重復(fù)性（恒流速下、同一柱）

內(nèi)容：測定相同組分多次色譜的保留時間RSD。

標準：RSD通常≤1%或更小。

7. 柱溫箱控溫性能

內(nèi)容：設(shè)置某一溫度，檢測實際溫度（內(nèi)置傳感器或溫度計）。

標準：與設(shè)定值偏差≤±1℃，一般±0.5℃。

8. 死體積/保留體積測試

內(nèi)容：用不可保留物質(zhì)（如尿素、甲酸鈉等）測柱死體積。

標準：資料對比，無異常，結(jié)構(gòu)吻合。

9. 其它確認項（視儀器及方法）

檢測器波長準確性（UV-Vis用校準濾光片或標準溶液），如鉻酸鹽等。

自動進樣器定位準確性。

混合器或梯度比例準確性等。

三、確認流程和注意事項

建立確認方案（含參數(shù)、標準、方法、頻次）。

使用校準過的量具、標準品和工具。

逐項測試并記錄原始數(shù)據(jù)。

和技術(shù)參數(shù)、法規(guī)或方法要求比對，判定是否合格。

確認單據(jù)需雙人校核、簽字，確保數(shù)據(jù)可靠性。

確認周期：多數(shù)實驗室建議新購機初次確認，每年/每半年周期性確認，或維修后、搬運后重新確認。